小鼠主動脈內(nèi)皮細胞是研究血管生物學(xué)、動脈粥樣硬化、炎癥反應(yīng)及藥物篩選的重要模型。其分離與培養(yǎng)技術(shù)對于心血管疾病的研究至關(guān)重要。本文詳細介紹小鼠主動脈內(nèi)皮細胞的分離、純化和培養(yǎng)方法，以確保獲得高純度和高活性的細胞。實驗材料與儀器試劑-磷酸鹽緩沖液（PBS，無鈣鎂）-膠原酶（TypeII，0.1%-0.2%）-內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基（如DMEM/F12+20%FBS+1%ECGS+1%青霉素/鏈霉素）-70%乙醇（用于消毒）-紅細胞裂解液（可選）儀器與耗材-超凈工作臺-CO?培養(yǎng)箱（37...

小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞是研究血腦屏障（BBB）功能、藥物遞送及神經(jīng)血管疾病的重要模型。然而，由于其分離和培養(yǎng)過程復(fù)雜，實驗人員常面臨細胞純度低、存活率差、功能異常等問題。本文總結(jié)mBMECs培養(yǎng)中的常見問題，并提出相應(yīng)的解決策略，以提高實驗成功率。1.細胞分離困難問題mBMECs的分離涉及腦組織消化、密度梯度離心和磁珠分選（如CD31/PECAM-1抗體標(biāo)記），但常出現(xiàn)細胞得率低或雜質(zhì)細胞（如周細胞、星形膠質(zhì)細胞）污染。對策-優(yōu)化消化條件：使用膠原酶/分散酶（Collagena...

大鼠肝微粒體憑借其與人類代謝通路的高度相似性、操作便捷性及成本優(yōu)勢，被廣泛應(yīng)用于藥理學(xué)、毒理學(xué)及藥物相互作用研究中。一、生物學(xué)特性與核心功能1.結(jié)構(gòu)與組成通過差速離心從肝組織勻漿中分離的亞細胞組分，主要由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)碎片構(gòu)成，其核心功能依賴于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上鑲嵌的Ⅰ相代謝酶和Ⅱ相代謝酶，以及鈉鈣依賴性ATP酶等轉(zhuǎn)運蛋白。2.代謝功能的多樣性大鼠肝微粒體可模擬肝臟的兩大代謝途徑：Ⅰ相反應(yīng)：介導(dǎo)的氧化、還原或水解反應(yīng)，將藥物轉(zhuǎn)化為更極性的代謝物（如羥基化、去甲基化）。Ⅱ相反應(yīng)：在UGTs、硫酸...

大鼠滑膜細胞（Synovialcells）作為一種重要的細胞類型，因其在關(guān)節(jié)功能和修復(fù)中的特殊作用，廣泛應(yīng)用于組織工程研究。滑膜是關(guān)節(jié)內(nèi)的一種重要軟組織，能夠分泌滑液并為關(guān)節(jié)提供潤滑，保持關(guān)節(jié)運動的平滑性。在組織工程中，大鼠滑膜細胞的應(yīng)用具備廣闊的前景，但同時也面臨一系列挑戰(zhàn)。一、潛力1.細胞源豐富且易于獲取大鼠作為實驗動物，其滑膜細胞的來源豐富且相對容易獲取。滑膜細胞能夠在體外進行擴增，為組織工程提供足夠的細胞量，這對于大規(guī)模生產(chǎn)和臨床應(yīng)用至關(guān)重要。2.良好的自我修復(fù)能力滑...

大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞（rBM-MSCs）具有多向分化潛能和自我更新能力，在組織工程、疾病模型構(gòu)建及細胞治療等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。要實現(xiàn)其高效提取，需綜合考慮多個關(guān)鍵因素。一、動物個體因素動物年齡是關(guān)鍵要素之一。幼年大鼠的骨髓腔內(nèi)干細胞含量相對較高且細胞活性強。一般來說，1-2周齡的Sprague-Dawley（SD）大鼠或Wistar大鼠較為適宜。因為隨著年齡增長，骨髓中脂肪細胞逐漸增多，會占據(jù)原本干細胞存在的空間，并且衰老的骨髓微環(huán)境也不利于干細胞的增殖與存活。性別也會產(chǎn)生影響。...

小鼠肺血管內(nèi)皮細胞（PECs）是肺部血管的關(guān)鍵組成部分，對肺循環(huán)的穩(wěn)定和氣體交換功能具有重要作用。研究肺血管內(nèi)皮細胞有助于了解肺部疾病的機制，如肺動脈高壓、肺水腫及其它血管相關(guān)疾病。本文簡要介紹了小鼠肺血管內(nèi)皮細胞的分離與培養(yǎng)方法。一、材料與設(shè)備1.動物模型：健康C57BL/6小鼠（8-12周齡，雄性或雌性均可）2.細胞培養(yǎng)基：EndothelialCellMedium（ECM），或含有10%胎牛血清（FBS）、1%抗生素（青霉素/鏈霉素）的DMEM/F-12混合培養(yǎng)基3.試...

小鼠心肌細胞提取技術(shù)廣泛應(yīng)用于心血管生物學(xué)、藥理學(xué)及細胞生物學(xué)研究。然而，在心肌細胞分離過程中，由于組織的特殊性和提取方法的復(fù)雜性，常常會遇到一些技術(shù)難題。本文將討論小鼠心肌細胞提取過程中常見的問題及相應(yīng)的解決方案。問題一：心肌細胞損傷與低活性原因：小鼠心肌細胞對機械性損傷較為敏感，尤其在組織剖解和酶消化過程中，容易導(dǎo)致細胞膜破裂或損傷，導(dǎo)致細胞活性降低。解決方案：1.優(yōu)化酶消化條件：選擇合適的膠原酶、彈性蛋白酶等消化酶，調(diào)整其濃度和消化時間，避免過度消化。可根據(jù)實際需求選擇...

小鼠破骨細胞是一種多核細胞，主要負責(zé)骨組織的吸收和重塑。有效的破骨細胞誘導(dǎo)對研究骨代謝及相關(guān)疾病（如骨質(zhì)疏松癥）具有重要意義。了解誘導(dǎo)過程中的關(guān)鍵因素，有助于優(yōu)化小鼠破骨細胞的培養(yǎng)方法，提高實驗結(jié)果的reproducibility和可應(yīng)用性。一、生長因子1、RANKL（受體激活因子核因子κB配體）RANKL是誘導(dǎo)破骨細胞形成的關(guān)鍵因子。它通過與破骨前體細胞表面的RANK結(jié)合，啟動下游信號通路，促進破骨細胞的分化與成熟。研究表明，RANKL濃度的變化直接影響破骨細胞的數(shù)量和活性...